一种银功能化硅基手性色谱固定相,包括:聚合物层、纳米银粒子层、硅胶核;其中,硅胶核为氨基硅胶或巯基硅胶,纳米银粒子层通过Ag‑N键包裹在氨基硅胶外或者通过Ag‑S键包裹在巯基硅胶外形成SiO2@Ag核壳结构,聚合物层为最外层,聚合物层通过分子间缩聚包裹的方法形成稳定的外层壳,聚合物层为键合型纤维素衍生物或键合型多糖衍生物;本发明还包括银功能化硅基手性色谱固定相的制备方法,包括以下步骤:(1)SiO2@Ag核壳结构的制备;(2)银功能化硅基手性色谱固定相的合成。银纳米粒子特有的结构,使得固定相对含O、N的手性化合物显示出特殊的选择性和分离能力,尤其适合酮类手性物质的拆分,和纤维素具有协同拆分作用。