一种细胞三维扩增培养用微载体的制备方法属于组织工程材料领域,以左旋聚乳酸PLLA为基体、明胶为分散剂,制备复合微球;并通过控制PLLA二氯甲烷溶液的浓度、纳米羟基磷灰石nHAp和PLLA质量比、明胶用量等,调控微球的粒径大小。以PLLA为基体保证支架的机械强度和生物降解性;复合nHAp在提高支架的骨诱导性和传导性的同时,协助PLLA提高细胞的成骨能力,防止细胞在过酸性环境下受损;nHAp的存在使PLLA微球表面形成了大量小孔,小孔的存在增强了支架的传质能力并为细胞提供更丰富的附着位点。本发明制备的微载体对成骨细胞表现出良好的生物学性能,适用于骨组织工程领域。