本发明提供了一种铜绿假单胞菌噬菌体,该铜绿假单胞菌噬菌体,菌株名为vB_PaeM_QKL1,保藏号CGMCC No.13381,分类命名为铜绿假单胞菌噬菌体,于2016年12月08日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”,简称CGMCC。本发明还提供了上述铜绿假单胞菌噬菌体的应用。本发明铜绿假单胞菌噬菌体尾刺中有胞外聚合物的降解酶类,能裂解细胞被膜进而裂解生物被膜产生菌,从而彻底去除细菌生物被膜;本发明铜绿假单胞菌噬菌体对铜绿假单胞菌生物被膜的抑制效果明显,能够破坏铜绿假单胞菌生物被膜,还可与抗生素、常用化学清洁剂联合应用。