本发明涉及一种晚熟马铃薯脱毒基础苗培养基及其制备方法,其特别之处在于,包括如下步骤:(1)培养基基本母液的配制,制备大量元素母液,制备微量元素母液,制备铁盐母液,制备1号有机物母液,制备2号有机物母液;(2)按每L培养基共加5g称取卡拉胶,按每g卡拉胶加入200ml蒸馏水;(3)将烧杯中的混合母液、C源加入已煮好的卡拉胶中;(4)用氢氧化钠或盐酸将pH值调到5.8~6.0;(5)装瓶后高压灭菌即可。本发明的培养基中不仅营养成分减少,而且还用低成本的卡拉胶代替琼脂作为凝固剂,不但试管苗生长旺盛且周期缩短,还有效减少了育苗中的能耗和成本。