本发明公开了一种抗艾滋病药物筛选方法,以PBS为模板、以PBS互补的DNA为引物,70℃,反应10min,依次加入缓冲液,水,DTT,dNTPS、药物、HIV RT,template/primer的浓度为1uM,50mM pH8.0 tris-HCl,60mM KCl,8mM MgCl2,1mM DTT,500mM dNTPS,0.5U HIV RT,于37℃反应1h,通过丙烯酰胺电泳分离,Storm 840扫描,定量分析,计算药物的HIV RT抑制率。利用该方法能够方便、快速地筛选抗HIV-1药物,为抗HIV-1药物提供新途径。