本发明公开了一种HPLC法同时测定八味龙钻颗粒中橙皮苷、氯化两面针碱及补骨脂素三种活性成分含量的方法,该方法采用的色谱条件如下:色谱柱Phenomenex Gemini C18 (250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈:0.1%磷酸水(梯度洗脱);流速为1ml.min‑1;检测波长为286nm和245nm(0~30min:286nm,30~40min:245nm);柱温30℃。进样量:5μL。在此色谱条件下,色谱峰分离良好,橙皮苷、氯化两面针碱及补骨脂素分别在84.68~508.1μg.ml‑1、16.84~101.0μg.ml‑1、5.504~33.02μg.ml‑1浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r分别为0.99053、1.00000、0.99998);平均加样回收率分别为98.1%、99.9%、100.1%,RSD分别为1.3%、2.7%、2.5%(n=6)。本方法简单、快速、准确、重现性好,可为全面评价和控制八味龙钻颗粒的质量提供理论依据。