本发明公开了一种肝癌检测试剂盒,包括有cel‑miR‑39序列,以及用于cel‑miR‑39、hsa‑miR‑10a‑5p、hsa‑miR‑455‑5p、hsa‑miR‑30b‑5p、hsa‑miR‑99a‑5p、hsa‑miR‑1271‑5p、hsa‑miR‑136‑3p、hsa‑miR‑3158‑3p、hsa‑let‑7f‑5p、hsa‑miR‑16‑5p、hsa‑miR‑432‑5p、hsa‑miR‑4446‑3p和hsa‑miR‑486‑3p实时定量PCR的引物,还包括有反转录试剂及实时定量PCR试剂,还包括含有能特异性检测RAI16蛋白的核酸适体,且核酸适体序列如SEQ ID NO.1‑23任一条序列所示,或者在该序列的基础上进行的一个或几个核苷酸的替换,并保留其活性,还包括有加了草酸钠抗凝剂的真空采血管和真空采血针组件。本发明用于肝癌筛查,具有高灵敏、成本低、易保存的优点,其测序所用接头和扩增引物均有成熟的市售商品,试剂盒易于制备。