本[发明专利]公开了一种水鬼蕉叶斑病致病毒素的提取及活性测定方法,其包括如下步骤:1)取患有叶斑病的水鬼蕉上的患病部位提取出灰霉菌粗毒素和轮枝孢菌粗毒素并鉴定;2)对步骤1)提取出的灰霉菌粗毒素和轮枝孢菌粗毒素进行蛋白质含量测定;3)将步骤1)提取出的灰霉菌粗毒素和轮枝孢菌粗毒素分别配制成不同浓度的溶液,通过涂抹法涂抹健康水鬼蕉幼苗叶片,进行致萎活性测定。本[发明专利]针对水鬼蕉叶斑病毒素的提取及活性测定方法,有效得出了灰霉菌粗毒素和轮枝孢菌粗毒素的蛋白质含量及对水鬼蕉叶斑病的影响,为后期水鬼蕉叶斑病的防治提供技术支持。