本发明公开了一种检测生物体内硫离子的荧光铜配合物及其应用,能够实现对生物体内硫离子的定量检测。荧光铜配合物的通式如下:检测生物体内硫离子的荧光铜配合物的应用包括:荧光铜配合物的体外细胞毒性测试;荧光铜配合物检测活体细胞内硫离子。检测活体细胞内硫离子包括:荧光铜配合物共聚焦荧光显微成像法检测活体细胞内硫离子;荧光铜配合物流式细胞术定量检测活体细胞内硫离子。本发明提供的铜荧光配合物具有较好的光稳定性,较高的荧光量子产率,较强的硫离子选择性,可以有效避免水体系以及复杂的生物体系内竞争物种的干扰。此外,该类铜配合物还具有较好的细胞通透性和较低的毒副作用。