[00009286]产气荚膜梭菌α毒素双抗体夹心ELISA定量检测方法
技术详细介绍
本发明涉及一种产气荚膜梭菌α毒素双单抗夹心ELISA检测方法，该检测方法是采用原核表达的α毒素蛋白为免疫原，利用杂交瘤技术制备单克隆抗体作为检测抗体和捕获抗体，通过试验优化反应条件，以系列含量的α毒素蛋白作为标准制作标准曲线，建立了双单抗夹心ELISA方法，并对该方法各项指标进行验证。具体包括以下步骤：（1）α毒素原核表达；(2)抗α毒素单克隆抗体的制备；(3)双单抗夹心ELISA方法的建立；(4)标准曲线的建立；（5）对该双单抗夹心ELISA方法进行性能评价。该方法特异性好、灵敏度高、稳定性好，快速、简便，且能有效地定量检测A～E型产气荚膜梭菌培养上清中α毒素，为α毒素提供了高效的检测工具。
