[00112254]椰心叶甲特异性苏云金芽孢杆菌新型cry基因的发掘

(1) 项目研究目的及主要研究内容。 本研究拟以微生物资源丰富的海南省为Bt菌株采集地,针对重要的棕榈作物害虫椰心叶甲进行活性菌株筛选并进行杀虫基因鉴定。以期寻找到对该害虫具有高毒力的菌株,制成制剂直接用于椰心叶甲的防控;对海南省的苏云金芽孢杆菌cry基因的分布进行统计,为转cry基因作物提供新的基因资源。 （2）项目任务书要求的主要考核技术、经济指标。 陆续在海南17个椰心叶甲危害市县进行样品的采集 ,并对样品进行相关数据记录（土壤状况、海拔、植被覆盖等）。室内筛选Bt菌株,并进行菌株的鉴定工作,筛选对椰心叶甲有活性的菌株对筛选Bt菌株进行cry基因型鉴定,并对新型cry基因进行全基因序列的克隆与表达针对椰心叶甲进行大量的毒力测定,对具有控制作用的Bt菌株进行野外释放技术与防治效果评估试验,掌握利用本土微生物天敌防治椰心叶甲的生物防治技术; 进行试验数据资料汇总分析,完成项目验收工作,发表论文2～3篇。 （3）项目主要技术与经济指标完成情况,主要解决的关键技术与创新点。 基本完成目标,从文昌、万宁、琼海、五指山、保亭等地采集了大量的土壤样品与僵虫样品共计1359份,筛选苏云金芽孢杆菌（Bt）39株;室内筛选到椰心叶甲有活性的菌株3株;克隆到新基因3个,,在NCBI数据库中氨基酸序列比对结果显示与已知的cry基因相似性分别为34%、94%与98%;构建了PSTK-8Ga3和PSTK-1Be3工程菌2个;在保亭县新政镇建立椰心叶甲综合防控示范基地一个,面积200亩,并在该基地进行了活性菌株的田间施用,效果待评估;发表论文3篇,专著一本。