[00118623]中国劲酒指纹图谱的研究

一、任务来源：劲牌公司是大冶市一家专业化的保健酒生产经营民营企业，年上交税收占大冶市总税收的1/3～1/4，在湖北省酒业中上交税收排名第一。中国劲酒是劲牌公司的主导产品，占公司总销售收入的85%以上。为了提高产品的质量，提升产品的技术核心竞争力，实现大冶乃至湖北省的酿酒行业的稳定、持续的发展。黄石市科技局于2003年8月下达了《中国劲酒指纹图谱的研究》黄石市科技项目计划任务书(黄科技术发计[2003]5号)。　　二、应用领域和技术原理中药指纹图谱系指某种或某产地的中药材或中成药经适当处理后，采用一定的分析手段得到的能够标示该中药材或制成品特征的色谱、光谱或其它图谱。由于中药指纹图谱的整体性、特征性和可重现性，该技术在中药及其相关产品的真伪鉴别、质量控制、产品创优以及生产过程控制等方面发挥着重要的作用。该项目通过建立中国劲酒从原料、中间体到成品的指纹图谱来控制中国劲酒原料采购及生产的全过程。　　三、性能指标该项目按照国家药典委员会颁布的《中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南（试行）》和《中药指纹图谱研究指导原则（讨论稿）》的要求，采用GC和HPLC相结合的方法，进行了各药材、中间体以及成品指纹图谱检测方法的研究，建立了相关药材、中间体和成品的指纹图谱。研究中进行了HPLC、GC色谱指纹图谱预试验和方法学考察，结合各药味所含的主要化学成分，对黄芪、肉苁蓉、仙茅、淫羊藿、枸杞子分别建立了HPLC指纹图谱，丁香、肉桂、砂仁分别建立了GC指纹图谱，当归则分别建立了GC和HPLC指纹图谱。采用HPLC和GC色谱技术，分别建立了中国劲酒中间体和成品的指纹图谱，并对相关药材、中间体、成品进行相关性研究。应用国家药典委员会推荐的计算机辅助相关性评价系统软件（中南大学中药现代化研究中心编制），分别综合评价了不同来源药材的相似度，确定了中国劲酒使用药材的来源和产地。并且通过对中国劲酒中间体和成品指纹图谱的研究，建立了对照指纹图谱。　　主要技术性能指标：　　1、中国劲酒指纹图谱方法学考察及特征峰指标项目 方法学考察相似度系数 特征峰数 特征峰定性样品 方法 精密度 稳定性 重复性 特征峰数 特征峰定性肉苁蓉HPLC 0.97 0.97 0.9910 2松果菊苷、类叶升麻苷黄 芪HPLC 0.99 0.98 0.9491毛蕊异黄酮葡萄糖苷仙 茅HPLC 0.97 0.96 0.9020 1仙茅苷淫羊藿HPLC 0.97 0.96 0.9619 1淫羊藿苷枸杞子 乙醚部份 HPLC 0.99 0.98 0.9712正丁醇部位 HPLC 0.97 0.93 0.9018 丁 香GC(顶空进样) 0.98 0.96 51丁香酚肉 桂GC(顶空进样) 0.92 0.98 51桂皮醛 当 归HPLC 0.99 0.97 0.9910 1阿魏酸 GC(顶空进样) 0.94 0.99 7 砂 仁GC(顶空进样) 0.98 0.93 11 1乙酸龙脑脂中国劲酒中间体I乙醚部位 HPLC 0.99 0.94 0.9829 4原儿茶醛、槲皮素、阿魏酸 5%异戊醇乙酸乙酯部位HPLC 0.95 0.93 0.9520 2淫羊藿苷、丁香酚 GC(顶空进样) 0.99 0.99 14 2乙酸龙脑酯、丁香酚中国劲酒中间体Ⅱ GC(顶空进样) 0.96 0.99 71乙酸龙脑酯成品 乙醚部位 HPLC 0.99 0.98 0.9713 2阿魏酸 5%异戊醇乙酸乙酯部位 HPLC 0.98 0.97 0.9815 1淫羊藿苷 GC(顶空进样) 0.97 0.98 82乙酸龙脑酯、丁香酚　　2、中国劲酒指纹图谱相关性指标： 　　(1)中国劲酒成品乙醚部位与药材的相关性（HPLC）(2)中国劲酒中间品I乙醚部位与药材的相关性(HPLC)(3) 中国劲酒成品乙酸已酯部位与药材的相关性(HPLC)(4) 中国劲酒中间品I乙酸已酯部位与药材的相关性(HPLC)(5) 中国劲酒成品GC指纹图与药材的相关性(6) 中国劲酒中间品I GC指纹图与药材的相关性 注：横坐标为样品各峰的保留时间，纵坐标无实质性意义，图中条形颜色代表各药材在此保留时间的出峰情况或与样品的相关情况。　　四、与国外同类技术比较。　　国外近几十年来在此领域的研究已经得到应用，美国FDA在植物药制品指导原则（征求意见用草案）中允许申报者提供产品的色谱指纹图谱资料。英国草药典、印度草药典以及加拿大药用及芳香植物学会、德国药用植物学会也都把指纹图谱作为质控标准的内容之一。指纹图谱检测技术作为多组分复杂样品的有效质量控制方法，目前国际上已普遍用于植物药、传统药物以及葡萄酒、卷烟等产品的质量控制。随着现代分析技术的快速发展、分析仪器的不断普及以及我国中药现代化的不断深入，特别是国家食品药品监督管理局在2000年颁发有关文件，首先在中药注射剂中实施指纹图谱检测方法，用以控制中药注射剂的质量，在我国掀起了中药指纹图谱研究的热潮。中国劲酒的指纹图谱研究正是依据是“中药注射剂指纹图谱研究技术要求（暂行）”和“中药注射剂指纹图谱实验研究技术指南（试行）”的相关要求开展研究的，用指纹图谱技术来评价产品，能够实现与国际接轨，由于中药是中国的国粹，在中药指纹图谱方面，中国劲酒的指纹图谱在国外走在前列。五、成果的创造性、先进性。由于指纹图谱技术的复杂性，目前国家仅对中药注射剂提出了指纹图谱的实验研究技术要求及技术指南，且注射剂一般为单方或小复方，建立指纹图谱相对较易。中国劲酒是一个由10味中药组成的复方保健酒，不管是在技术难度和工作量二方面，其指纹图谱检测标准的建立在保健食品行业乃至中药行业均开创了国内外的先河。保健食品质量评价使用指纹图谱技术本身就体现了其质量控制技术的先进性。　　该技术具有真实、稳定、可靠的优点，应用于保健食品的质量控制，突破了传统的显微鉴别、理化鉴别、含量测定等质量控制技术的局限性，解决了中药成分复杂、质量不易控制的问题，填补了保健食品指纹图谱质量控制的空白，达到国际先进水平。　　六、作用意义（直接经济效益和社会意义）。　　该项目对中国劲酒所用的药材、中间体和成品进行系统的指纹图谱研究，建立中国劲酒药材、中间体和成品的指纹图谱检测标准，从原料、生产过程和最终产品全过程控制中国劲酒质量，为广大消费者提供质量一致、稳定的优质保健酒。该项目的研究，不仅可以进一步完善中国劲酒的生产工艺、提高中国劲酒的质量、树立中国劲酒的品牌、促进中国劲酒的市场开拓，同时为我国保健酒产业和中药现代化提供示范作用，具有巨大的经济效益和社会效益。直接经济效益：项目成果在中国劲酒生产和质量控制中应用一年来，中国劲酒的质量得到的明显的稳定和提升，产品生产一次性合格率及生产效率得到了明显的提高，产品市场竞争力有了明显的提升。从2003年到2005年，产品市场增长率连续保持在30%以上。产品消费者满意率由原82%是上升到92%。直接经济效益1200万元。　　社会意义：中国劲酒指纹图谱的研究与成果应用，本身是对中药现代化的一个有力的推进，在保健食品行业是率先典范，在果露酒行业更是首创。通过中国劲酒指纹图谱的研究，国内保健食品行业的有实力的相关企业品牌也陆续有产品跟上来进行其指纹图谱的研究，这对共同推进包括中药注射液在内的中药行业指纹图谱技术的应用和带动保健食品行业的质量评价与控制的技术提升均有重大意义。　　推广范围：中国劲酒指纹图谱研究项目可产生的技术包括其9种原料指纹图谱检测标准及2个中间品、1个成品指纹图谱检测标准。其中9种原料指纹图谱是药材本身的化学成份指纹图谱，可用于所有使用上述原料的企业及产品质量控制。中国劲酒中间品及成品指纹图谱的检测技术则专属于中国劲酒的质量控制技术，用于中国劲酒生产过程和中间体、成品的质量控制。作为指纹图谱的建立方法及评价方法则可在中药行业推广和借鉴。　　推广前景：中国劲酒指纹图谱技术已在劲牌有限公司全面应用。随着中国劲酒20000吨生产线的投产，该项技术将全面用于中国劲酒生产过程控制和中间体、成品的质量控制，从各个环节确保中国劲酒质量的稳定性和一致性。作为一种与世界接轨的天然药物质量评价方法，指纹图谱技术已在中药注射剂上推广，在中药行业也将逐步推行。　　推广措施：中药或天然药物的产地、品种、加工方法的确定，工艺稳定的中药及其提取物、制成品；具有适当的检测分析仪器（液相色谱、气相色谱、GC顶空进样器）；经过培训的检测分析人员即可推行应用指纹图谱技术。