[00144308]新型固定化酯酶的开发及用于维生素A棕榈酸酯的酶法工业化制备

维生素A 棕榈酸酯是维生素A 主要的系列产品之一,被广泛用于食品、药物、营养保健品、化妆品、饲料添加剂等行业中。目前国内厂家基本以维生素A中间体或成品为起始原料化学合成,产品在色度及热稳定性等质量方面不及采用酶法生产的德国BASF公司,而且工艺中产生大量三废,环保形势严峻。 为了解决该产品生产过程中存在的问题,浙江大学与浙江新和成股份有限公司自2009年开始,对该生产工艺进行酶法改造研究。该项目利用酶工程的技术手段,围绕着如何发现酶,改造酶,以及有效地使用酶制剂等关键问题展开应用基础研究工作,开发了新型固定化酯酶,成功地建立了国内首条工业化酶法制备维生素A棕榈酸酯生产线。该项目的技术创新点如下： 1、发明了通过修改分子力场,利用分子对接技术实现酶功能预测并用于高通量虚拟筛选的新方法,成功筛选到有工业化应用前景的酯酶BioH 和Rsp; 2、发明了基于荧光指示pH变化的新型高通量酯酶筛选方法,成功改造酯酶,显著提高酶催化效率; 3、发明了定向共价固定化酶新方法,成功制备高稳定性的固定化酶。 采用酶法制备VA棕榈酸酯取得了显著的经济及社会效益。可实现废水零排放,完全不使用腐蚀性,刺激性原料如氯化亚砜,纯碱,甲基吡啶等,真正实现了绿色生产;同时,产品基本不发生顺反异构转化现象,大幅提升了产品品质。根据国家质量标准检测,各项产品指标均超过了BASF的相同产品。本项目共授权中国发明专利5项,并在Biotechnologyand Bioengineering （2篇）等国际期刊上发表SCI文章18篇。