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本发明涉及生物技术及酶工程领域,具体公开了一种耐热性及比活力均有提高的β‑甘露聚糖酶突变体Man5AS11R及其编码基因。通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β‑甘露聚糖酶Man5A进行K16C和D296C的双突变,可得到突变体Man5AS,该突变体的耐热性较Man5A提高了5oC,即Man5AS在80oC高温下保持3min可残留80%以上酶活,而Man5A在只能在75oC下保持3min维持80%酶活;在此基础上,针对Man5AS氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,继续进行R21V,I80D和I218E三个点的同时突变,得到氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的突变体Man5AS11R,其耐热性较Man5AS保持不变的前提下,比活力较Man5A和Man5AS分别提高了22.5%和31.4%。显示了更好的开发应用前景。