[00070253]重组红鳍东方鲀干扰素调节因子2蛋白及制备方法
技术详细介绍
本发明公开一种重组红鳍东方鲀干扰素调节因子2（IRF2）蛋白及制备方法，提取新鲜红鳍东方鲀肾脏总RNA，并反转录进行第一链的cDNA的合成；以所得到的第一链的cDNA为模板、设计引物扩增该基因的蛋白编码序列并与pMD19T载体连接得重组质粒，经双酶切后再与表达载体pET-32a(+)连接，获得重组表达质粒并转化至大肠杆菌BL21（DE3）中；通过IPTG诱导实现了重组蛋白的可溶性表达。该表达质粒表达的融合蛋白带有组氨酸标签，将细胞破碎后取上清纯化，避免了样品的变性和复性，不但操作简单，更主要的是蛋白结构不受破坏；重组蛋白纯度好、得率高且不易降解，适应于工业化生产。
