本发明提供一种纤维酶辅助的芒果叶中芒果苷和槲皮素的提取方法,将鲜芒果叶预处理后得干燥的芒果叶粉末,备用;称取干燥的芒果叶粉末,并加入pH为5.1的75%乙醇溶液,加入6mg纤维素酶,于55℃下浸泡酶解70min;浸泡后的提取体系在100W下超声提取40min,真空抽滤得芒果叶黄酮类物质粗提液;将芒果叶黄酮类物质粗提液过硅胶层析柱分离纯化,用不同梯度的洗脱剂进行梯度洗脱,每个梯度使用3倍于柱体积的洗脱液进行洗脱,洗脱速率控制在1mL/min;分段收集得到芒果苷和槲皮素。本发明填补了现有技术中该技术的空白,而且本发明提取方法易于操作、成本低,还具有稳定性好、提取率高的特点,能够适应于工业化生产。